Okatest

Cuantifica las toxinas del grupo del ácido okadaico, así como su toxicidad asociada, mediante un ensayo biológico y sin necesidad de elevadas inversiones en equipamiento o personal altamente cualificado. Test complementario al método de referencia para cuantificar todas las toxinas del grupo del ácido okadáico.

 

¿Quieres asegurar que tu producto no provoca una intoxicación diarreica (DSP)?
¿Necesitas demostrar que tus moluscos o conservas cumplen los requisitos legales en contenido de toxinas del grupo del ácido okadaico?
¿Quieres saber cuándo es el mejor momento para la cosecha o venta de tus moluscos?
¿Necesitas reducir costes o tiempo en el seguimiento en zonas cerradas por okadaico?

 

¿CÓMO TE AYUDA?

 

Okatest te ayuda elegir la zona y momento de la cosecha, evitando extraer moluscos que pudieran estar contaminados por su proximidad a zonas cerradas por presencia de esta toxina. Con Okatest puedes establecer un autocontrol antes de la extracción del molusco y en el producto final asegurando que es apto para su consumo y evitando el procesado innecesario de producto contaminado.
Okatest te permite ofrecer resultados en el mismo día ya que puedes procesar hasta 43 muestras en unas 3 horas. Además, podrás combinarlo con el método de referencia obteniendo resultados para todo el grupo de toxinas lipofílicas en menos tiempo; así como hacer el seguimiento de las zonas cerradas por ácido okadaico.

MATRIZ
MOLUSCOS

MEJILLONES

ALMEJAS

OSTRAS Y VIEIRAS

APLICACIONES Y USUARIOS
PRODUCTORES

CONSERVEROS

LABORATORIOS

PROCEDIMIENTO DE ENSAYO

1. Extracción de la muestra:

50 μL muestra/estándar y 70 μL fosfatasa.

2. Incubación:

90 μL substrato – 30ºC/20 min. 30ºC/30 min.

3. Resultados:

lectura fotométrica a 405 nm

Nombre del video

1. Dilución de la muestra:

Aplicar muestra/patrón. Incubación.

2. Conjugado:

Incubación

3. Resultados:

Lectura fotométrica a 450nm

PRINCIPIO DEL TEST

Okatest es un ensayo enzimático basado en la inhibición de la actividad de la fosfatasa (PP2A) por las toxinas del grupo del ácido okadaico (AO). En condiciones normales, la fosfatasa es capaz de hidrolizar un sustrato específico obteniéndose un producto que puede ser detectado a 405 nm. En presencia de toxina diarreica se producirá una inhibición de la actividad enzimática proporcional a la cantidad de toxina diarreica presente en la muestra.

DATOS TÉCNICOS

  • Rango de trabajo: 63 -352 μg/Kg.
  • Ensayo: 1 h de extracción más 2 etapas de 20 y 30 minutos.
  • Formato: Placa de 48 y 96 pocillos. Total de 43 muestras.
  • Equipos necesarios: Lector de placas de 405 nm.

 

Validaciones:

Validación intra-laboratorio:
Smienk et al. 2012 Single Laboratory Validation of A Ready-to-Use Phosphatase Inhibition Assay for Detection of Okadaic Acid Toxins. Toxins, 5, 339-352.

Validación inter-laboratorio:

Validación con 16 laboratorios procedentes de 11 países. Smienk et al. 2013. Quantitative Determination of the Okadaic Acid Toxins Group by a Colorimetric Phosphatase Inhibition Assay: Interlaboratory Study. Journal of AOAC International Vol. 96, No. 1.

Participación en ensayos inter-laboratorio: Quasimeme laboratory performance studies 2012-2015

OkaTest puede usarse como método complementario al método de referencia para la determinación de las toxinas del grupo del AO en moluscos de acuerdo con el Reglamento (CE) No 853/2004 y el No 2074/2005 del Parlamento Europeo (http://www.aecosan.msssi.gob.es/en/CRLMB/web/public_documents/seccion/other_crlmb_standard_operating_procedures.htm)

 

Legislación:

Reglamento (CE) n° 853/2004 del Parlamento Europeo y del Consejo, de 29 de abril de 2004, por el que se establecen normas específicas de higiene de los alimentos de origen animal.

El presente Reglamento establece normas específicas (establece los límites máximos) destinadas a los operadores de empresa alimentaria en materia de higiene de los alimentos de origen animal. Las presentes disposiciones complementan las establecidas por el Reglamento (CE) n o 852/2004. Serán aplicables a los productos de origen animal tanto transformados como sin transformar.

Reglamento (CE) No 2074/2005 de la Comisión, de 5 de diciembre de 2005 , por el que se establecen medidas de aplicación para determinados productos con arreglo a lo dispuesto en el Reglamento (CE) n o 853/2004 del Parlamento Europeo y del Consejo y para la organización de controles oficiales con arreglo a lo dispuesto en los Reglamentos (CE) n o 854/2004 del Parlamento Europeo y del Consejo y (CE) n o 882/2004 del Parlamento Europeo y del Consejo, se introducen excepciones a lo dispuesto en el Reglamento (CE) n o 852/2004 del Parlamento Europeo y del Consejo y se modifican los Reglamentos (CE) n o 853/2004 y (CE) n o 854/2004.

Además de los métodos de análisis biológicos deben aceptarse métodos de detección alternativos, como son los métodos químicos y los ensayos in vitro, si se demuestra que son tan eficaces como el método biológico y que su aplicación proporciona un nivel equivalente de protección de salud pública.

Reglamento (UE) n ° 15/2011 de la Comisión, de 10 de enero de 2011, por el que se modifica el Reglamento (CE) n ° 2074/2005 en lo relativo a los métodos de análisis reconocidos para la detección de biotoxinas marinas en moluscos bivalvos vivos.

Como alternativa o como complemento al método LC-MS/MS del LR-UE podrán utilizarse otros métodos, como la cromatografía líquida (LC)/espectrometría de masas (MS), la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con la detección adecuada, los inmunoensayos y los ensayos funcionales como el de la inhibición de fosfatasas.

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